抗氧化酶活性檢測 抗氧化酶含量測定
抗氧化酶是超氧化物歧化酶、硫氧還蛋白過氧化物酶、谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶等的統(tǒng)稱。抗氧化酶具有將體內(nèi)形成過氧化物轉(zhuǎn)換為毒害較低或無害的物質(zhì)的功效。一旦在體內(nèi)形成過氧化物,它們即刻發(fā)揮作用,利用氧化還原作用將過氧化物轉(zhuǎn)換為毒害較低或無害的物質(zhì)。下面就將對抗氧化酶的檢測進(jìn)行詳細(xì)介紹。
關(guān)于抗氧化酶,可對其提供活性檢測、含量檢測等檢測項(xiàng)目。同時(shí)可對超氧化物歧化酶、硫氧還蛋白過氧化物酶、谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶等進(jìn)行檢測。
1、NBT法
超氧化物歧化酶能夠催化過氧化脫氫麥角酮(NBT)被還原成紫色水溶性產(chǎn)物,通過測定產(chǎn)物的吸光度來確定SOD的活性。具體步驟如下:
a.準(zhǔn)備反應(yīng)體系:稱取適量的細(xì)胞提取液,加入適量的NBT緩沖液。
b.開始反應(yīng):置于適當(dāng)?shù)臏囟群蜁r(shí)間下。
c.停止反應(yīng):加入硝酸,停止NBT的還原反應(yīng)。
d.測定吸光度:使用分光光度計(jì)測量產(chǎn)生的相對吸光度。
2、氰化硝酸法
該方法是通過抑制SOD對自由基的清除作用,使過氧化物離子被產(chǎn)生,進(jìn)而通過測定過氧化物離子的吸光度來間接測定SOD的活性。具體步驟如下:
a.準(zhǔn)備反應(yīng)體系:稱取適量的細(xì)胞提取液,加入適量的氰化鉀和亞硝酸鈉。
b.開始反應(yīng):加入適量的氧化劑,使之和SOD反應(yīng)生成過氧化物。
c.測定吸光度:使用分光光度計(jì)測量過氧化物離子產(chǎn)生的相對吸光度。
1、YY/T 1458-2016 抗甲狀腺過氧化物酶抗體定量檢測試劑(盒)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)
2、GB 30604-2015食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑 1,3-二油酸-2-棕櫚酸甘油三酯
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