原花青素定性分析 原花青素含量檢測
原花青素(簡稱PC)是一類多酚化合物,由多個兒茶素、表兒茶素分子或兩者混合聚合而成,廣泛存在于自然界多種植物中。這類化合物在酸性介質(zhì)中加熱可產(chǎn)生花青素,因此被命名為原花青素。原花青素具有抗氧化、清除自由基、抗誘變的能力,其體內(nèi)抗氧化能力是維生素E的50倍、維生素C的20倍。
原花青素的提取方法有多種,包括傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑提取法、綠色溶劑提取法、液相萃取法、固相萃取法、柱層析法,以及近年來新開發(fā)的超臨界流體萃取法、微波提取法、雙水相萃取法等。
原花青素屬于植物多酚類物質(zhì),分子由兒茶素、表兒茶素(沒食子酸)分子相互縮合而成,根據(jù)縮合數(shù)量及連接的位置而構(gòu)成不同類型的聚合物,如二聚體、三聚體、四聚體等,其中二到四聚體稱為低聚體原花青素,五以上聚體稱為高聚體。在各聚合體原花青素中,功能活性最強(qiáng)的部分是低聚體原花青素(OPC)。通常把聚合度小于6的組分稱為低聚原花青素,而把聚合度大于6的組分稱為多聚體。
低聚原花青素是純天然、水溶性的,且在280nm處有較強(qiáng)的紫外吸收性,可抑制酪氨酸酶的活性,抑制因蛋白質(zhì)氨基和核酸氨基發(fā)生的美拉德反應(yīng),從而抑制脂褐素、老年斑的形成。這些特性使得低聚原花青素在國外防曬美白化妝品中占有重要地位。
原花青素不僅存在于葡萄籽中,還存在于許多水果、蔬菜和谷物中,如紫甘藍(lán)、葡萄、紫薯、黑皮花生、黑布林、藍(lán)莓、黑芝麻、黑豆、越橘、桑葚、紫茄子等深色食物中。下面就將對原花青素的檢測進(jìn)行詳細(xì)介紹。
關(guān)于原花青素,可對其提供外觀、定性檢測、定量檢測、氣味、水分、灰分、酸價、過氧化值、原花青素含量、總酚含量、重金屬、農(nóng)藥殘留等檢測項(xiàng)目。
同時可對單體原花青素、低聚原花青素、葡萄籽、黑枸杞、藍(lán)莓酒、沙棘、原花青素膠囊、紅酒、原花青素提取物、白藜蘆醇、紫甘薯、黑豆、高聚原花青素等進(jìn)行檢測。
原花青素的檢測方法主要包括分光光度法、流動注射-抑制化學(xué)發(fā)光法、高效液相色譜法、原子吸收法。
1、分光光度法
分光光度法是一種常用的原花青素檢測方法,具體包括鐵鹽催化法、Folin-Ciocalteau法、香草醛法、鉬酸銨法、硫酸高銨法、高鐵鹽-鐵氰化鉀法等。這些方法利用原花青素在特定條件下的化學(xué)反應(yīng),通過測量反應(yīng)產(chǎn)物的吸光度來定量原花青素的含量。
2、流動注射-抑制化學(xué)發(fā)光法和高效液相色譜法
流動注射-抑制化學(xué)發(fā)光法和高效液相色譜法也是原花青素檢測的有效手段。流動注射-抑制化學(xué)發(fā)光法通過流動注射技術(shù)將樣品引入化學(xué)發(fā)光反應(yīng)系統(tǒng)中,測量抑制化學(xué)發(fā)光的程度來測定原花青素。高效液相色譜法則利用色譜柱將原花青素與其他成分分離,通過檢測器測量原花青素的峰面積或峰高,從而確定其含量。
3、原子吸收法
原子吸收法雖然不如前述方法常見,但在某些特定應(yīng)用中也有其用途,通過測量原花青素對特定元素的吸收程度來定量分析。
這些方法各有特點(diǎn),選擇時需考慮樣品的性質(zhì)、檢測的靈敏度要求以及實(shí)驗(yàn)條件等因素。例如,分光光度法因其操作簡便、成本較低而被廣泛應(yīng)用;流動注射-抑制化學(xué)發(fā)光法和高效液相色譜法則提供更高的靈敏度和分辨率,適用于更復(fù)雜的樣品分析;原子吸收法則在特定元素的檢測中具有獨(dú)特優(yōu)勢。
原花青素的檢測標(biāo)準(zhǔn)主要包括以下幾個方面:
1、GB/T 22244-2008《保健食品中前花青素的測定》
這是一個關(guān)于保健食品中前花青素測定的標(biāo)準(zhǔn),它依據(jù)氰定的原理,即在酸性條件加熱和鐵鹽催化作用下,試樣中前花青素單體或聚合物生成深紅色花青素離子,然后在高效液相色譜儀中,經(jīng)C18反相柱分離,在波長525nm處檢測。
2、DB12/T 885-2019《植物提取物中原花青素的測定 紫外/可見分光光度法》
這是一個關(guān)于植物提取物中原花青素測定的標(biāo)準(zhǔn),它采用紫外/可見分光光度法,通過把標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)原花青素和樣品在酸性條件下加熱,產(chǎn)生深紅色的花青素離子后進(jìn)行檢測,從而計(jì)算出試樣中原花青素含量。
3、DB64/T 1578-2018《黑果枸杞中花青素含量的測定 高效液相色譜法》 和 DB65/T 4039-2017《黑果枸杞原花青素含量的測定 液相譜法》
這兩個標(biāo)準(zhǔn)分別針對黑果枸杞中的花青素含量和原花青素含量的測定,采用了高效液相色譜法和液相譜法。
4、DB22/T 2529-2016《紫穗玉米花青素測定 分光光度法》
這是一個關(guān)于紫穗玉米中花青素測定的標(biāo)準(zhǔn),采用分光光度法。
5、GOST 33767-2016《食品添加劑. E163食品色素花青素中總色素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的識別和測定方法》 和 GOST 32709-2014《果汁產(chǎn)品. 花青素的測定方法》
這兩個標(biāo)準(zhǔn)分別針對食品添加劑中的花青素和果汁產(chǎn)品中的花青素測定方法。
這些標(biāo)準(zhǔn)涵蓋了從保健食品到植物提取物,以及特定食品添加劑和果汁產(chǎn)品的原花青素或花青素的測定方法,采用了包括高效液相色譜法、液相譜法、紫外/可見分光光度法等多種技術(shù)手段。若有需要更多檢測標(biāo)準(zhǔn),可直接聯(lián)系我們的工程師咨詢了解。
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