修護測試——復達客戶檢測案例
2021年12月27日,上海某大學電話咨詢我司相對于他們研發的化妝品修護的功效檢測
客戶是上海某大學技術人員。新研發的產品需要備案做個預實驗看下修護功效,希望我們協助測試
護膚乳
1.實驗材料:
1.1細胞系:人永生化角質細胞
1.2培養基:含 10%胎牛血清(FBS)的 MEM 培養基,2-8℃保存 2 周
1.3 測試條件:溫度 37±0.5℃,濕度>90% ,5% CO2 濃度
1.4 溶液及對照:陰性對照組(NC):含 0.4%FBS 的 MEM 培養基陽性對照組(PC):含 10%FBS 的 MEM 培養基
待測物質(TA):用 0.4%FBS 的 MEM 培養基稀釋至測試濃度
2.試驗步驟:
2.1細胞活性測試
2.1.1細胞常規培養。制備細胞懸液,將細胞懸液接種于 96 孔細胞培養板,培養。
2.1.2棄去孔中原培養液,每孔加入不同濃度的測試樣品,返回培養箱孵育。
2.1.3取出培養板,每孔加入MTT 溶液,培養箱孵育。去除孔中液體,每孔加入 DMSO,置于振蕩器振蕩后, 在酶標儀測定吸光度。
2.1.4數據分析:細胞活性以陰性對照組的細胞活性為 100%,計算各組相對細胞活性(Viability)。
2.2細胞遷移測試
2.2.1常規培養細胞,使用帶有 2 孔插入物的 24 孔細胞培養板,每孔接種,返回培養箱培養至細胞融合。
2.2.2小心用鑷子取出培養板中的培養插入物,培養插入物 2 孔之間形成一道平整的無細胞區域。用 PBS 清洗細胞層 3 次,去除脫落的細胞。
2.2.3每孔加入 1 mL 含不同濃度的測試樣品的培養液,同時在鏡下采集圖像,記為 0 h,標記所采集的位置。
2.2.4每隔 24 h,在所標記的相同位置,采集圖片,記為 24 h 和 48 h。
2.2.5數據分析:采用IPP 圖像分析軟件,分析每個圖像劃痕區域的面積,以 0 h 為 100%,計算相對面積。
3.試驗結果:
3.1細胞活性測試
經由客戶同意后,篩選三個濃度作為后續功效實驗測試濃度。
3.2細胞遷移測試
在 3.2 測試條件下,24 h 時,與陰性對照組相比,陽性對照組遷移修復的速率明顯加快(P<0.05);樣品組三個濃度均比陰性對照組遷移修復快(P<0.05)。48h 時,各組遷移面積基本修復完全。
客戶對于測試結果和我們技術人員進行探討、我們相互研究并且給予了客戶原始平行數據,誤差范圍。并且后續要求我們對其采集的樣品定期檢測。