液相柱后衍生測試——復達客戶檢測案例
2021年09月22日,客服中心反饋武漢某大學客戶有對通過柱后衍生對樣品的抗氧化性能研究的測試需求,接到反饋后,分析實驗室工程師第一時間與客戶進行詳細溝通,了解到情況如下:
客戶是武漢某大學的學生,在實驗研究過程中想探究樣品中各種有機酸阿魏酸、咖啡酸、香豆酸、原兒茶酸、香草酸等八種物質的抗氧化能力,設計實驗如下:液相梯度洗脫使不同種類的有機酸分離,這些有機酸具有紫外吸收,可被 DAD 檢測器檢測出,經液相分離的各種有機酸流入柱后衍生儀反應池,同時儀器將 DPPH 試劑泵入反應池中。這些有機酸具有自由基清除能力,能夠與 DPPH 自由基發生反應。DPPH溶液呈深紫色,在可見光區 517 nm 處具有最大吸收;與有機酸反應后,顏色變淺,可見光吸收強度降低,在譜圖中表現出負峰,然后將將有機酸紫外吸收峰與反應后 DPPH 的吸收峰對應起來,直觀地反映這些有機酸的抗氧化能力。相比于柱前衍生,柱后的在線衍生方式能夠實時反映被分離物的抗氧化能力,避免受外界因素的影響從而影響結果判斷。
多酚
樣品液相色譜儀柱后 DPPH 試劑在線衍生譜圖測試。
溝通客戶寄送樣品,分析實驗室接收到樣品后對樣品進行拍照,根據客戶提供的方案和預實驗條件,我們配制八種物質的標準品混合溶液,進行液相DAD測試,確定每個物質的保留時間,然后在搭建的液相-衍生儀-DAD檢測器的儀器上進行測試,通過改變 DPPH 試劑的流速、混合標準溶液的進樣量等各項實驗條件摸索最佳的實驗方案,最后使用該方法對六批樣品進行測試,得到測試譜圖。
客戶對我們開發的方法以及測試譜圖很滿意,完全滿足客戶的要求并達到預期結果,同時我們也將實驗條件、儀器型號、測試方法等數據提供給客戶,以便于客戶使用自身的儀器能夠重復試驗以及發表論文使用。